Русский
!

Presentations

Identification of 3 unknown strains (52613, 52621, Ac-1025)

Plotnikova M., Trubitsina L.

Pushchino, Russia, j.mariia@rambler.ru.

Цель работы: идентификация трех неизвестных штаммов микроорганизмов.

Объект исследования: неизвестные штаммы 52613, 52621, Ас-1025 из ВКМ (Всероссийская коллекция микроорганизмов ИБФМ РАН г. Пущино).

Отбор проб и культивирование: бактериальные клетки были предоставлены сотрудниками отдела ВКМ (http://www.vkm.ru) Института биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН.

Молекулярно-биологические методы: ДНК штаммов были выделены с использованием набора Genomic DNA Purification Kit (Thermo Fisher Scientific) по методике производителя с модификаций: обработкой клеток лизоцимом перед внесением лизирующего раствора. Фрагмент гена 16s рРНК был амплифицирован с помощью специфичных праймеров 27F (AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG) и 1492R (ACG GYT ACC TTG TTA CGA CTT). Полимеразная цепная реакция включала денатурацию матрицы в первом цикле при 95°С в течение 5 мин и 35 циклов амплификации в следующем режиме: 95°С - 30 c, 55°С - 30 с, 72°С - 1 мин. Анализ ПЦР-продуктов проводили в 1,3% агарозном геле с бромистым этидием (0,0002%). Продукты ПЦР величиной порядка 1500 п.о. были очищены из геля с использованием набора Cleanup Mini (Евроген, Россия) и переданы в компанию Евроген для определения нуклеотидной последовательности.

Результаты исследования: таким образом, с помощью методов молекулярной биологии была проведена идентификация трех неизвестных штаммов микроорганизмов (52613, 52621, Ас-1025), полученных из ВКМ.

© 2004 Designed by Lyceum of Informational Technologies №1533